耐思课堂 | 细胞培养总失败？很多问题来自“污染”

细胞培养中最常见的 4 种污染

1 细菌污染（最常见）

细菌污染通常发展非常迅速，是实验室中最常见的污染类型。

常见表现：

• 培养液快速变浑浊

• 培养基颜色变黄

• 显微镜下可见大量微小颗粒快速运动

常见来源：

• 操作过程中无菌控制不严格

• 枪头、移液管或培养瓶口接触污染

• 培养基或血清污染

一旦发生细菌污染，通常不建议继续培养，应及时废弃污染细胞并彻底清洁培养设备。

2 真菌污染

真菌污染虽然发生频率低于细菌，但扩散速度同样很快。

常见表现：

• 培养液中出现絮状或棉絮状漂浮物

• 显微镜下可见丝状或分枝结构

• 细胞贴壁状态明显变差

真菌孢子广泛存在于空气中，因此在操作过程中暴露时间过长或操作环境不洁净，都可能增加污染风险。

3 支原体污染（最隐蔽）

支原体污染是细胞培养中最隐蔽、也最容易被忽视的问题之一。

与细菌或真菌不同，支原体污染通常不会导致培养液浑浊，因此肉眼很难发现。

可能出现的情况包括：

• 细胞生长速度明显变慢

• 细胞形态发生变化

• 实验数据重复性下降

因此，实验室通常需要定期进行支原体检测，确保细胞体系的可靠性。

4 细胞交叉污染

除了微生物污染外，细胞系之间的交叉污染也是实验室中需要警惕的问题。

例如：

• 不同细胞同时操作

• 标识管理不规范

• 移液器或枪头使用不当

都可能导致细胞系混杂，最终影响实验结果。