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贴壁细胞的多层培养瓶使用指南来了
345 人阅读发布时间：2023-07-18 10:35
贴壁细胞的多层培养瓶使用指南来了
贴壁细胞培养是生命科学领域中常见的实验技术之一
它可以应用于多种场景，包括但不仅限于:
药物筛选:通过培养贴壁细胞，可以测试药物的疗效和毒性，从而筛选出具有治疗潜力的药物。
细胞学研究:贴壁细胞培养可以为细胞学研究提供许多有用的信息，例如细胞分裂、分化和转化等
疾病模型:通过培养患者的贴壁细胞，可以建立与某些疾病相关的细胞模型，例如癌症。
基因编辑:贴壁细胞培养可以为基因编辑提供重要的支持，例如CRISPR-Cas9基因编辑技术。
总之，贴壁细胞培养是一项非常重要的生命科学技术，可以应用于许多不同的场景和研究领域。
使用指南-细胞悬液接种到多层细胞培养瓶
1.细胞悬液混匀:按照实验要求的浓度准备细胞，在培养基瓶、培养瓶或其他容器中混匀。建议的工作容积为每层30-50 mL.
2.用移液管紧贴瓶壁缓慢地将液体加到五层细胞培养瓶中，避免产生泡沫或者气泡(每次加液时移液管内液体可留少许)。
注意事项: 10 ml移液管可以伸到培养瓶底部使培养基分散开，而25 mL移液管则只能伸到NEST标志的地方把液体分散开。
3.把培养瓶有NEST标志那一侧朝向自己，顺时针做斜45度左右放置一段时间，使瓶中各个隔层的液体达到平街。
4.轻缓地将培养瓶水平放置于工作台上，有NEST标志那一面朝上。
5.前后左右轻轻晃动多层瓶，液体会均匀地分布在五个生长面上。
注意事项:摇晃的动作要轻柔，一方面是防止起泡沫，另一方面是要防止培养基渗漏到下层中。
培养液的移除
1.抽吸法:
1）抽吸的时候，将多层瓶做斜45度，有NEST标志的一面朝向自己
2）将移液管伸到底部抽吸培养基，直至完全抽吸完。
2. 倾倒法:将有NEST标志的一面朝向自己，逆时针45度倾倒液体。
注意事项: 抽吸培养液时建议使用10 mL移液管，才能将培养液吸尽
细胞的收集
1.用缓冲液清洗一遍以去除残留的血清，后加入消化液 (> 5 mL层)，混匀。
2.消化大约2 min (视细胞情况而定) ，用消化终止液中和消化液
3.采用移液管抽吸法或做倒法将细胞悬液置于离心管等容器中。
4.用一定量的缓冲液冲洗多层瓶三次，将冲洗液分别置于离心管中,混与计数或者传代接种。